编号 zgly0000483700

文献类型 期刊论文

文献题名 基于RNA复制子GHRH基因表达载体的构建及在293细胞中的表达

作者 任晓慧  乔继光  刘松财  张明军  章倩倩  侯峰　  吕铁钢  周立光  吴琼  欧阳松应  张永亮 

作者单位 吉林大学畜牧兽医学院  河北农业大学海洋学院  深圳市肉品卫生检验所  中国协和医科大学  华南农业大学动物科学学院 

母体文献 畜牧兽医学报 

年卷期 2007,38(4)

页码 395-399

年份 2007 

分类号 Q789 

关键词 生长激素释放激素  塞姆利基森林病毒  复制子 

文摘内容 本研究将GHRH基因克隆到塞姆利基森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pCMV-Rep-lacZ,构建了真核表达载体pCMV-Rep-GHRH。采用脂质体介导将表达质粒pCMV-Rep-GHRH转染293细胞,经RT-PCR、IFA、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot检测,证明表达质粒pCMV-Rep-GHRH在293细胞中正确地表达了GH-RH多肽分子。本研究还利用放免法检测质粒载体转染细胞培养上清中GHRH浓度,初步比较了RNA复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体(pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH)的表达效率,结果表明,转染48 h,RNA复制子载体表达GHRH的含量显著高于普通载体,分别比pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH高出36.12%(P〈0.05)和67.94%(P〈0.05)。结论: 构建的真核表达载体pCMV-Rep-GHRH能够在真核细胞293中表达GHRH多肽分子,且表达水平显著高于普通载体,为下一步更好地调控动物生长以提高动物生产性能奠定基础。