编号 zgly0001299911

文献类型 期刊论文

文献题名 大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定

作者 成大荣  徐建生  王秋娟  孙怀昌  高崧 

作者单位 扬州大学兽医学院  扬州大学兽医学院 江苏扬州225009  江苏扬州225009  江苏扬州225009 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2005年06期

年份 2005 

分类号 S852.61 

关键词 大肠杆菌  菌毛  F18  FedA/ac  表达  鉴定 

文摘内容 根据已经发表的F18ac菌毛A亚单位的基因序列(FedA)设计一对引物,利用PCR技术从重组质粒T 8813A 中扩增到一段序列,并按预定的阅读框插入表达性质粒载体pGEX 6p 1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedA/ac,并转化大肠杆菌BL 21 获得重组菌PPFedA/ac。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该序列大小为456 bp,与已发表的FedA/ac结构编码序列完全一致。通过对菌体裂解物的SDS PAGE 分析以及Western blotting 鉴定,证明重组大肠杆菌PP FedA/ac的可以表达融合蛋白形式的FedA/ac (命名为GST FedA/ac),即FedA/ac蛋白(15.317 ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335 ku)相连组成分子量为42.652 ku的融合蛋白。利用GST FedA/ac制备的兔抗GST FedA/ac 血清与大肠杆菌F107/86 株( F18ab+ )、2 134 P 株(F18ac+)进行的玻板凝集试验呈现阳性反应,进一步表明了表达的正确性。