编号 zgly0001515721

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕核型多角体病毒Bm90基因缺失对病毒增殖和组装的影响

作者 巩成见  田星  蒋磊  于威  舒建洪  吴银丽  童富淡 

作者单位 浙江理工大学生命科学学院  浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室  宁海县动物卫生监督所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年03期

年份 2016 

分类号 S884.5 

关键词 家蚕核型多角体病毒  Bm90基因  λRed重组系统  Bac-to-Bac系统  病毒增殖  病毒组装 

文摘内容 家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)基因组中的orf90基因(Bm90)是一个未知功能的保守基因。利用λRed重组系统和Bac-to-Bac系统构建野生型病毒Wt Bacmid-polh-egfp、Bm90基因缺失型病毒Bm90ko-polh-egfpBacmid及Bm90基因补回型病毒Bm90re-polh-egfp-Bacmid,并制备Bm90蛋白的多克隆抗体,研究Bm90基因在病毒感染周期中的表达以及对病毒增殖和组装的影响。将3种重组病毒分别转染Bm N细胞,Western blot检测显示Bm90蛋白在病毒转染Bm N细胞后72 h有表达;但用荧光显微镜观察Bm90基因缺失型病毒转染的Bm N细胞中没有出现绿色荧光,且检测其病毒滴度为0;用透射电子显微镜观察在Bm90基因缺失型病毒转染的Bm N细胞中没有子代病毒粒子出现。研究结果表明,Bm90基因缺失会抑制子代病毒粒子的组装和产生,使病毒失去侵染性,Bm90基因是病毒增殖及组装的必需基因。