编号
zgly0001354145
文献类型
期刊论文
文献题名
间接ELISA法检测羊促乳素抗体方法的建立
作者单位
西北农林科技大学动物医学院
西北农林科技大学动物科技学院
母体文献
西北农林科技大学学报(自然科学版
年卷期
2009年02期
年份
2009
分类号
S826.3
关键词
促乳素
抗体
间接ELISA法
文摘内容
【目的】建立促乳素单克隆抗体制备中筛选阳性分泌细胞的间接ELISA检测方法?!痉椒ā坑么偃樗卮科酚隖reund佐剂免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,初次免疫采用抗原与完全Freund佐剂,每2周免疫1次,从第2次开始采用抗原与不完全Freund佐剂,免疫4次后尾静脉采血,收集血清制备阳性对照抗体,以未免疫的BALB/c小鼠血清为阴性对照,筛选间接ELISA法检测促乳素抗体的最佳反应条件,并对单克隆抗体制备中的阳性细胞进行筛选?!窘峁考浣覧LISA法的最佳反应条件:血清稀释倍数为1∶200,抗原包被质量浓度为100 ng/mL,封闭液为1%牛血清白蛋白,酶标抗体的工作浓度为1∶10 000,酶标抗体作用时间为37℃90 min,底物作用时间37℃30min。用该方法检测融合的杂交瘤细胞,最终获得OD450为0.875和0.460的阳性细胞株?!窘崧邸拷⒘思觳獯偃樗乜固宓募浣覧LISA检测方法,该方法方便易行。