编号 zgly0001528802

文献类型 期刊论文

文献题名 割手密叶绿体DNA的高效提取方法

作者 田春艳  李富生  何丽莲  娄红波  杨清辉  肖关丽  胡海洋  唐荣平  王先宏 

作者单位 云南农业大学甘蔗研究所  云南临沧高等师范专科学校数理系 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年01期

年份 2016 

分类号 S566.1 

关键词 割手密  叶绿体DNA  高盐-低pH法  高效提取 

文摘内容 为了提取高质量的割手密叶绿体DNA(chloroplast DNA,cp DNA),本研究立足于高效、省时、低耗的原则,以割手密幼叶为材料,采用改进的高盐-低p H法经差速离心分离叶绿体、DNaseⅠ处理、10%SDS和蛋白酶K裂解叶绿体、DNA萃取、乙醇沉淀等一系列操作。所提取的割手密cp DNA经显微观察、紫外吸收光度测定、琼脂糖凝胶电泳、叶绿体基因特异引物PCR扩增等进行检测,结果表明该提取方法简单高效,A260/A280的比值介于1.9~2.0,cp DNA纯度高,浓度为2.90μg/μL,适用于基因扩增等分子操作。研究结果为进一步开展割手密叶绿体基因功能、系统发育、遗传多样性等方面的研究奠定了基础。