编号 zgly0001480907

文献类型 期刊论文

文献题名 可视化环介导等温扩增技术检测Phytophthora tentaculata

作者 戴婷婷  康振烨  吴小芹 

作者单位 南京林业大学南方现代林业协同创新中心  江苏省有害生物入侵预防与控制重点实验室南京林业大学林学院 

母体文献 南京林业大学学报(自然科学版 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S763 

关键词 Phytophthora tentaculata  环介导等温扩增  PtYpt1  羟基萘酚蓝(HNB) 

文摘内容 为了能在植物发病早期快速、准确地鉴定出Phytophthora tentaculata引起的疫病,控制疫病的传播和流行,减少其造成的经济损失,笔者以Ypt1基因为靶序列应用环介导等温核酸扩增技术(loop-mediated isothermal am-plification,LAMP),建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的P.tentaculata检测方法。结果表明:在等温条件下(64℃)进行核酸扩增反应80 min,反应后经2%琼脂糖凝胶电泳和扩增前加入染料HNB(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂验证扩增结果,在特异性实验中,P.tentaculata菌株能够扩增到梯形状的条带,同时HNB显色观察到天蓝色的阳性反应,而从其他疫霉、腐霉和真菌供试菌株中均没有观察到这些现象。在灵敏度试验中,PtYpt1-LAMP技术最低检测限为1 ng/μL。