编号 zgly0001381485

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕吡哆醛激酶的融合表达与纯化

作者 张平平  张剑韵  黄龙全 

作者单位 安徽农业大学生命科学院  安徽农业大学茶与食品科技学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2010年09期

年份 2010 

分类号 Q78  Q96 

关键词 家蚕  吡哆醛激酶  融合表达  纯化  酶活性 

文摘内容 【目的】吡哆醛激酶(pyridoxal kinase,PLK,EC2.7.1.35)是维生素B6的关键代谢酶。本研究原核表达家蚕Bombyxmori重组PLK,为进一步开展家蚕PLK的催化作用机制和表达调控机制的研究奠定基础。【方法】构建家蚕PLK基因融合表达质粒,转化大肠杆菌Escherichia coli诱导表达,经Ni2+亲和层析纯化后,对融合蛋白的催化活性进行分析?！窘峁看炕蟮募也现刈镻LK经SDS-PAGE鉴定为单一条带,比活力为1800U/mg,纯化倍数为40倍。在底物过量的条件下,该重组酶的体外最适反应温度是50℃;最适pH为5.5~6;Zn2+是酶促反应有效的激活剂?！窘崧邸恐刈榧也螾LK与来源于家蚕组织的PLK具有相同的催化性质。