编号 zgly0001719780

文献类型 期刊论文

文献题名 真菌病毒FpgMBV1中P3基因的原核表达及多克隆抗体的制备

作者 李轲  刘东伟  王志芳  谢源  张晓婷  李洪连 

作者单位 河南农业大学植物?；ぱг?ensp;

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2020年05期

年份 2020 

分类号 S432.4 

关键词 假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1  P3蛋白  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 采用RT-PCR法从假禾谷镰孢菌（Fusarium pseudograminearum）弱毒菌株FC136-2A的菌丝中扩增出假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1（Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1,FpgMBV1）的P3蛋白编码序列。测序结果显示,FpgMBV1-P3蛋白的编码序列长2 700 bp,编码901个氨基酸残基。构建原核表达载体pET28a-FpgMBV1-P3并转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株,在25℃以0.5 mmol·L-1 IPTG诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为90 kDa,与预期分子量大小相符。将该重组蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得抗血清,采用间接ELISA测定其效价达1∶128 000,能够特异性检测到假禾谷镰孢菌菌丝中的FpgMBV1-P3蛋白。研究结果可为探究FpgMBV1-P3的结构和功能,以及进一步探讨FpgMBV1在假禾谷镰孢菌弱毒菌株FC136-2A中的作用机制奠定基础。