编号 zgly0001322336

文献类型 期刊论文

文献题名 Cry1Ac的绿色荧光蛋白GFP标记及其在棉铃虫幼虫中肠的定位分布

作者 史艳霞  张永军  王桂荣  梁革梅  高继国  吴孔明 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室  中国农业科学院植物?；ぱ芯克?ensp; 植物病虫害生物学国家重点实验室  东北农业大学生命科学院  北京100094东北农业大学生命科学院  哈尔滨150030  北京100094 

母体文献 植物?；ぱП?ensp;

年卷期 2007年05期

年份 2007 

分类号 S435.622 

关键词 Cry1Ac毒蛋白  绿色荧光蛋白GFP  重叠PCR  定位分布 

文摘内容 为了明确Cry1Ac蛋白在棉铃虫体内与中肠组织的相互作用,采用重叠PCR方法将Bt-cry1Ac基因和绿色荧光蛋白GFP基因融合,构建含Cry1Ac毒蛋白和绿色荧光蛋白GFP原核表达载体,并在大肠杆菌大量表达。利用荧光显微镜观察发现,表达Cry1Ac-GFP融合蛋白的大肠杆菌在蓝光激发下发出绿色荧光。将含有融合蛋白的菌液拌入人工饲料饲喂3龄棉铃虫幼虫96h,取棉铃虫幼虫中肠做冰冻切片并在荧光显微镜下观察。结果显示,取食含有Cry1Ac-GFP融合蛋白饲料的棉铃虫幼虫中肠能够发出强烈荧光。比较Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性棉铃虫幼虫中肠的发光部位,敏感棉铃虫幼虫的中肠围食膜已经消失,肠壁细胞发出强烈的荧光,而抗性棉铃虫的围食膜较健全并发出荧光。