编号 zgly0001526572

文献类型 期刊论文

文献题名 采用环介导等温扩增法(LAMP)快速检测苹果根结线虫

作者 魏洪岩  王暄  李红梅  孙文荣  顾建锋 

作者单位 南京农业大学植物?；ぱг号┳魑锷镌趾ψ酆现卫斫逃恐氐闶笛槭?ensp; 宁波出入境检验检疫局 

母体文献 植物?；ぱП?ensp;

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 S432.45 

关键词 苹果根结线虫  环介导等温扩增  优化  特异性  灵敏度 

文摘内容 为高效、简便、快速地对我国进境植物检疫性有害生物名录中的非中国种—苹果根结线虫Meloidogyne mali进行检疫,通过比较Gen Bank中根结线虫相关序列,以苹果根结线虫28S r DNA非保守区域序列设计环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）的特异性引物,并优化反应条件,建立一种可快速检测苹果根结线虫的LAMP检测体系。结果显示:d NTPs浓度为0.4 mmol/L、Mg2+浓度为5.0 mmol/L、不添加甜菜碱、反应时间为60 min时,LAMP检测体系扩增效率最高;用琼脂糖凝胶电泳、SYBR Green I染色和LFD试纸均能检测到苹果根结线虫的扩增产物。所建立的LAMP检测体系能够从10种供试植物线虫种群中特异性地检测出苹果根结线虫,灵敏度为1/20 000条线虫DNA,比常规PCR灵敏度高10倍。表明所建立的苹果根结线虫LAMP快速检测体系可用于我国口岸进境植物中苹果根结线虫检疫。