编号 zgly0001423482

文献类型 期刊论文

文献题名 新城疫病毒核酸检测标准物质研究

作者 谷强  张伟  高志强  张鹤晓  刘环  蒲静  乔彩霞  张利峰 

作者单位 北京出入境检验检疫局 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2012年11期

年份 2012 

分类号 S855.3 

关键词 新城疫病毒  核酸扩增  标准物质 

文摘内容 分别设计了3对引物,从灭活新城疫病毒F48E9株和Lasota疫苗株病毒提取的RNA中扩增了完整的M、FA和HN基因编码序列,并克隆于pGEM-T。经测序确认后,采用体外转录方法制备了6种RNA纯品。初步定量后,用RNA保存液稀释至含量约108拷贝数/mL,分装。分装后均一性检测结果显示瓶间差异<5%,稳定性实验表明室温20～25℃(相对湿度20%～50%)14天稳定;长期监测结果表明:2～8℃6个月及-20℃保存1年的含量均无明显变化。委托多家实验室采用外标实时荧光定量RT-PCR检测方法对制备的标准物质进行准确定值。以上结果表明该制备物可以作为新城疫病毒的核酸检测标准物质。