编号 zgly0001445730

文献类型 期刊论文

文献题名 松材线虫类毒过敏原蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

作者 林世锋  简恒  赵海娟  卜祥霞  刘倩 

作者单位 贵州省烟草科学研究院  中国农业大学植物病理学系农业部植物病理学重点实验室 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2013年02期

年份 2013 

分类号 S763.3 

关键词 松材线虫  类毒过敏原蛋白  基因优化  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 利用重叠延伸PCR基因合成法,按大肠杆菌偏爱密码子,合成松材线虫类毒过敏原蛋白基因(Bxvap2),将其连接到原核表达载体pET-29b(+)上?；竦玫闹刈樽幼蟪Ω司鶥L21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析表明,目的蛋白以可溶形式高效表达,占细菌总蛋白的33.5%。将表达产物经Ni-NTA亲和柱纯化后进行质谱分析,结果显示纯化的蛋白为BXVAP2蛋白。用制备的BXVAP2蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,间接ELISA测得抗体灵敏度5.4 ng.mL-1(效价为1∶1 360 000),为进一步研究该蛋白的组织定位及功能,明确该基因在致病过程中的作用机理奠定了基础。