编号 zgly0001140384

文献类型 期刊论文

文献题名 用PCR试验和粪便培养检测牛粪便中副结核分枝杆菌的比较

作者 李凯年 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 1994年04期

年份 1994 

分类号 S854 

关键词 分枝杆菌  副结核  粪便培养  牛粪便  聚合酶链反应（PCR）  排菌数  二步PCR  一步PCR  结核分枝杆菌DNA  探针检测 

文摘内容 由副结核分枝杆菌引起的Johne’s病是一种对养牛业具有重要经济意义的疾病。由于缺乏准确快速的诊断试验，影响了对本病的控制。为此，作者研制了一种聚合酶链反应（PCR）试验检测粪便中副结核分枝杆菌，并与一种商品PCR试验和粪便培养进行了比较。本法先取5克粪样提取其中副结核分枝杆菌DNA。然后进行第一步PCR，即向干燥DNA加5帅1反应混合物，置于热周期仪中使其经30个周期变性（97C下30秒）和合并进行退火与延伸（65C下1分钟）。再用45UI含有SPI第一步PCR溶液的新鲜反应缓冲液进行第二步PCR，用前述相同条件进行第二步PCR20个周期，但最后周期延伸时间为10分钟。扩增后，分别用凝胶电泳