编号 zgly0001435812

文献类型 期刊论文

文献题名 鲤鱼春季病毒血症病毒磷蛋白基因的克隆与原核表达

作者 李月红  付云红  Julia Pridgeon  宋琳  张东鸣 

作者单位 吉林农业大学动物科技学院  美国农业部水产动物健康研究实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2012年07期

年份 2012 

分类号 S941.41 

关键词 鲤春病毒血症病毒  P蛋白  原核表达 

文摘内容 【目的】克隆鲤鱼春季病毒血症病毒(SVCV)的磷蛋白(P蛋白)基因,并对其进行原核表达,为进一步制备SVCV P蛋白单克隆抗体及建立新的SVCV诊断方法奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增SVCV P蛋白基因,将其克隆入pET-28a(+)载体中,获得原核重组表达质粒pET28-P,进行原核表达。将该重组原核表达质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用0.4mmol/L IPTG进行诱导表达,用镍亲和层析试剂盒对表达产物进行纯化,分别用SDS-PAGE和Western Blotting方法对表达产物进行鉴定?！窘峁砍晒寺×薙VCV P蛋白基因,该基因长度为933bp。成功构建了原核重组表达质粒pET28-P,其诱导表达产物分子质量约为37ku;表达的重组P蛋白可被SVCV阳性血清所识别。【结论】成功克隆了SVCV P蛋白基因,获得了分子质量约为37ku的重组P蛋白。