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柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

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编号 zgly0001677804

文献类型 期刊论文

文献题名 柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

作者 黄爱军  王莹  丁敏  卢占军  易龙 

作者单位 赣南师范大学生命科学学院国家脐橙工程技术研究中心 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2019年08期

年份 2019 

分类号 S436.66 

关键词 柑橘  柑橘衰退病毒  柑橘碎叶病毒  柑橘黄化脉明病毒  柑橘叶斑驳病毒  多重PCR 

文摘内容 柑橘衰退病毒(CTV)、柑橘碎叶病毒(CTLV)、柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)和柑橘叶斑驳病毒(CLBV)是影响柑橘生产的重要病毒性病害,建立快速、准确的检测方法是防控该病害的基础。本研究通过筛选针对4种病毒基因组保守区域设计的特异性引物,优化影响多重RT-PCR扩增的引物浓度、退火温度,建立了可同时扩增4种病毒的多重RT-PCR检测体系。该检测体系扩增的特异片段大小分别是CTLV 889 bp、CYVCV 612 bp、CTV 462 bp和CLBV 294 bp,扩增产物清晰,特异,检测灵敏度较普通单重RT-PCR灵敏度低约10倍。采用多重RT-PCR和单重RT-PCR对收集到的59份田间样品分别进行检测,结果显示2种方法检测结果一致,4种病毒的检出率在11.9%~54.2%之间。建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、灵敏地检测单一或复合侵染的4种柑橘病毒。

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