编号 zgly0001392959

文献类型 期刊论文

文献题名 猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达

作者 敬晓棋  吴发兴  丛丽媛  张佩君  陈德坤 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  榆林学院生命科学研究中心  中国动物卫生与流行病学中心动物流行病学监测室  陕西省教育学院生物系 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年05期

年份 2010 

分类号 S852.659.2 

关键词 猪圆环病毒2型  ORF2  原核表达 

文摘内容 【目的】构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2原核表达质粒载体,高效重组表达PCV2壳蛋白Cap,为进一步建立PCV2 ELISA的检测方法及Cap蛋白单克隆抗体的制备研究奠定基础?！痉椒ā扛葜碓不凡《?型ORF2基因序列设计带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点的引物,进行ORF2的PCR体外扩增。用扩增的ORF2基因构建pMD18-T-ORF2质粒,经测序检测正确后,与pET-32a(+)连接获得原核表达重组质粒pET-32a-ORF2。重组质粒pET-32a-ORF2转化BL21-ΔE3后用IPTG诱导表达,对获得的纯化表达产物进行了SDS-PAGE电泳、Western blot检测?！窘峁縋CR扩增得到了预期580 bp的目的基因,连接载体后经测序完全正确;pET-32a-ORF2在BL21-ΔE3得到高效表达,获得以包涵体形式存在的体外重组原核表达PCV2 Cap蛋白;Western blot检测结果表明,所得到的蛋白能够识别PCV2多克隆抗体。【结论】重组质粒pET-32a-ORF2在BL21-ΔE3高效表达重组PCV2 Cap蛋白,且具有免疫学生物活性。