编号 zgly0001376386

文献类型 期刊论文

文献题名 产单核细胞李斯特菌溶血素O单克隆抗体的制备与鉴定

作者 孔德壮  张衍海  龚振华  李葳  郑增忍  李玉清  张彦明 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  中国动物卫生与流行病学中心 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年07期

年份 2010 

分类号 Q789 

关键词 产单核细胞李斯特菌  李斯特菌溶血素O  单克隆抗体 

文摘内容 【目的】制备抗产单核细胞李斯特菌溶血素O(LLO)的特异性单克隆抗体?！痉椒ā坑肔LO重折叠的原核表达产物LLO-his免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞,与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选、多克隆及单克隆分离出阳性细胞株后,再用体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定其效价及相对亲和常数;用HBT单克隆抗体亚类鉴定试剂盒鉴定抗体亚型;常规方法制备染色体,观察细胞株染色体数目及标志染色体;Western blot检测抗体的特异性?！窘峁炕竦昧?株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为3F5-G3和2B4-C8,其腹水效价分别为1∶(1×105)和1∶(1×107);染色体分别为97±5和93±8条,且观察到标志染色体;相对亲和常数分别为0.49和0.26μg/mL;抗体亚类均为IgG1,轻链均为κ链。特异性鉴定结果表明,2种单克隆抗体均可与LLO蛋白发生特异性反应,而与载体蛋白不发生反应?！窘崧邸炕竦昧丝筁LO的特异性单克隆抗体。