编号 zgly0001693850

文献类型 期刊论文

文献题名 利用共转化方法创制携带Pi9抗稻瘟病基因的无选择标记转基因水稻

作者 潘龙玉  李军  王歆  刘中来  赵建华  刘雄伦  戴良英  毛雪琴  瞿绍洪 

作者单位 浙江师范大学化学与生命科学学院  浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所  湖南农业大学作物种质创新与资源利用省重点实验室  浙江省农业科学院植物?；び胛⑸镅芯克?ensp;

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2020年02期

年份 2020 

分类号 S435.111.41 

关键词 水稻(Oryzasativa)  共转化  稻瘟病(Magnaportheoryzae)  转基因植物  选择标记 

文摘内容 水稻稻瘟病是由子囊菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻灾害性病害。培育抗病品种是防治稻瘟病最经济有效的措施之一。水稻Pi9抗稻瘟病基因来源于小粒野生稻并已被克隆和应用于转基因育种。为了提高无选择标记转基因植株的选择效率,将绿色荧光蛋白(GFP)用作可视遗传标记,对双菌株共转化系统进行改良:目的基因载体携带Pi9抗稻瘟病基因;标记基因载体用潮霉素磷酸转移酶(HPT)作为植物转化选择标记,用GFP作为负选择标记,筛除标记基因分离植株。两种载体的农杆菌转化株混合,分别与水稻品种‘浙恢414’、‘浙粳22’、‘浙11B’、‘日本晴’、‘空育131’和‘粤泰B’的愈伤组织共培养,然后从5%～38.3%的起始愈伤组织筛选获得了转化愈伤组织(HPT+GFP+)。对T0植株进行Pi9基因PCR检测,11.8%～77.8%的T0植株为共转化植株(HPT+GFP+Pi9+)。对共转化植株T1代进行绿色荧光检测,筛选阴性植株(GFP-),再通过PCR筛选Pi9+植株。根据13个T1群体的研究结果,61%的共转化植株在T1代分离出无选择标记转基因植株(HPT-GFP-Pi9+)。转Pi9的无选择标记植株和后代株系对水稻稻瘟病呈抗病反应。因此,本研究通过GFP标记提高了双菌株共转化系统的选择效率,转Pi9的无选择标记水稻株系为水稻抗稻瘟病育种提供了有用的遗传资源。