编号 zgly0001566452

文献类型 期刊论文

文献题名 拟南芥蛋白激酶SnRK1.1的激酶活性分析

作者 袁敏  邢继红  王莉  葛伟娜 

作者单位 华北理工大学生命科学学院基因组学与计算生物学研究中心  河北农业大学真菌毒素与植物分子病理学实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2017年08期

年份 2017 

分类号 Q946 

关键词 蛋白激酶SnRK1.1  融合蛋白  底物  免疫沉淀  激酶活性 

文摘内容 本研究分别纯化了细菌内的蛋白激酶SnRK1.1融合蛋白和拟南芥中的蛋白激酶SnRK1.1蛋白,使用合成的SP11多肽片段作为底物,通过体外激酶试验结合放射性同位素γ32P检测了SnRK1.1蛋白对底物SP11的磷酸化活性。与GST蛋白相比,GST-SnRK1.1融合蛋白能够显著磷酸化底物SP11多肽片段;与野生型Col-0纯化产物相比,从转基因拟南芥中免疫沉淀得到的GFP-SnRK1.1蛋白也能够显著磷酸化底物SP11多肽片段。最终,本研究成功建立了蛋白激酶SnRK1.1的体外磷酸化检测体系,为深入研究SnRK1.1的功能及其SnRKs家族成员参与调控的信号通路奠定了基础。