编号 zgly0001651811

文献类型 期刊论文

文献题名 梨黑斑病菌遗传操作体系的建立与RFP标记转化子的致病性分析

作者 李丙新  何锋  刘娟娟  赵延存  孙伟波  操海群  刘凤权 

作者单位 安徽农业大学植物保护学院  江苏省农业科学院植物?；ぱ芯克?ensp;

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 S436.612.1 

关键词 梨黑斑病菌  原生质体  遗传转化 

文摘内容 由链格孢（Alternaria alternata）引起的梨黑斑病是我国梨生产上的主要病害之一,导致梨叶与果实产生黑斑症状及早期落叶,对我国梨产业的健康发展构成严重威胁。本实验在前期获得强致病性梨黑斑病菌菌株HN-5基础上,建立该病菌的遗传转化体系。通过优化原生质体制备过程以及转化体系发现梨黑斑病菌HN-5原生质体制备的最优条件为:菌丝在M R液体培养基中培养36 h;以0.7 M NaCl+0.8 M Mannitol为稳渗剂,配置复合细胞壁裂解酶（1%崩溃酶+1%裂解酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶）,酶解菌丝3 h,原生质体的产量可达0.5×107个·mL-1。通过PEG介导的原生质体遗传转化体系,将含有RFP基因的质粒p KD7转入链格孢菌HN-5中,转化效率为6个·μg-1DNA。PCR检测和转化子荧光观察均表明RFP基因整合到了HN-5基因组中并成功表达。致病性分析发现RFP （Red Fluorescent Protein）标记转化子致病性未发生变化。本研究成功建立了PEG （Polyethylene glycol）介导的梨黑斑病菌遗传转化体系,构建了RFP标记菌株,为研究该病菌的致病机理奠定基础。