编号 zgly0001445750

文献类型 期刊论文

文献题名 齿兰环斑病毒运动蛋白基因的原核表达及多克隆抗体制备

作者 詹瑞基  李欲轲  李明健  洪鲲  乙引  万晴姣 

作者单位 贵州师范大学生命科学学院 

母体文献 植物检疫 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S436.8 

关键词 齿兰环斑病毒  运动蛋白  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 采用RT-PCR技术从感染齿兰环斑病毒贵州分离物(ORSV-GZ)的苋色藜叶片中扩增出该病毒的运动蛋白(MP)基因。测序结果表明:该MP基因全长912 bp,编码303个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-MP,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在25℃以1.0 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白基因。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为54 kDa,与预测相符合。以该重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备的抗体效价达1:25600。该多抗与ORSV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他5种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。