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稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法

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编号 zgly0001311992

文献类型 期刊论文

文献题名 稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法

作者 刘同宝  卢建平  林福呈 

作者单位 浙江大学生命科学学院  浙江大学生物技术研究所 杭州310029  杭州310029 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2006年02期

年份 2006 

分类号 S435.111.4 

关键词 稻瘟病菌  附着胞  抑制性差减杂交 

文摘内容 利用抑制性差减杂交方法构建了稻瘟病菌分生孢子接种24 h所形成的附着胞差异表达基因文库。采用复印胶片诱导稻瘟病菌附着胞形成,在孢子浓度为1.0×106个/mL时,附着胞的形成率达到96.5%。分别提取附着胞、菌丝和分生孢子RNA,反转录成cDNA并经A luⅠ酶切、接头连接后,以附着胞cDNA片段为tester,菌丝及分生孢子cDNA为driver进行抑制性差减杂交,构建成差减文库。从文库中分离获得142个基因片段,通过RT-PCR方法鉴定其中的71个为差异表达基因,证实文库高效可靠。构建优质的稻瘟病菌附着胞差异表达基因差减文库,为深入了解附着胞形成过程中基因的表达及功能奠定了基础。

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