编号 zgly0001373914

文献类型 期刊论文

文献题名 SMART策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

作者 赵桂媛  魏志刚  刘关君  张凯旋  刘桂丰  杨传平 

作者单位 东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S792.11 

关键词 小黑杨  形成层  SMART  cDNA文库 

文摘内容 为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART(RNA转录过程中的5′末端转换机制)技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5～2.0kb之间,平均长度为1.12kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。