编号
zgly0001748204
文献类型
期刊论文
文献题名
古樟端?;駽cTBP1和CcPOT1的克隆、亚细胞定位及表达分析
作者单位
江西省观赏植物遗传改良重点实验室
母体文献
北京林业大学学报
年卷期
2022,44(12)
页码
1-11
年份
2022
分类号
S792.23
关键词
古樟
端粒基因
克隆
亚细胞定位
表达分析
文摘内容
【目的】端?;蛟谥参镒橹ダ虾头只讨蟹⒒幼胖匾牡骺刈饔谩1狙芯客ü怨耪炼肆;駽cTBP1和CcPOT1进行克隆与生物信息学分析、亚细胞定位及在古樟及其复幼扦插苗中的表达水平检测,初步揭示端?;蛟诠耪粮从浊げ宀欢ǜ⑸讨械墓δ?为探究古樟复幼的端粒调控机理奠定基础?!痉椒ā勘狙芯恳? 200年树龄的古樟为研究材料,提取叶片RNA,利用PCR和同源克隆相结合的方法克隆端粒基因CcTBP1和CcPOT1,并对其序列进行生物信息学分析;通过构建过表达载体进行亚细胞定位分析;以及通过实时荧光定量(qRT-PCR)分析CcTBP1和CcPOT1在古樟及其复幼扦插苗不同组织和不定根发生过程中的表达模式?!窘峁?1)克隆获得2个端?;?分别命名为CcTBP1和CcPOT1。CcTBP1基因编码序列(CDS)长2 163 bp,编码720个氨基酸;CcPOT1基因CDS序列长1 407 bp,编码468个氨基酸。(2)序列相似性和系统进化树分析结果显示:CcTBP1蛋白与牛樟RWR76720.1序列相似性高达98%,二者亲缘关系最近;CcPOT1蛋白与牛樟RWR96964.1序列相似性高达99%,二者亲缘关系最近。(3)亚细胞定位分析结果显示:CcTBP1蛋白定位在细胞核中,CcPOT1蛋白定位在细胞质和细胞核中。(4)根茎叶qRT-PCR表达分析发现,CcTBP1基因在古樟根中的表达水平最高,CcPOT1基因在复幼扦插苗根中的表达水平最高。不定根发生过程中的表达分析发现:CcTBP1呈下调表达趋势,在古樟不定根中的表达量高于复幼扦插苗;CcPOT1基因呈上调表达趋势,在古樟不定根中的表达量低于复幼扦插苗。【结论】古樟端?;駽cTBP1和CcPOT1在古樟复幼不定根发生过程中具有重要的调控功能。