编号 zgly0001639077

文献类型 期刊论文

文献题名 草莓镶脉病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及鉴定

作者 杨菊梅  马建忠  潘博  李印武 

作者单位 兰州理工大学生命科学与工程学院  兰州大学第二医院  甘肃启明星节能科技有限公司 

母体文献 植物?；ぱП?ensp;

年卷期 2018年03期

年份 2018 

分类号 S436.68 

关键词 草莓镶脉病毒  外壳蛋白  抗原表位  原核表达  质谱鉴定 

文摘内容 为实现草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的简单和快速检测,应用生物信息学方法分析了SVBV外壳蛋白的线性抗原表位及其理化性质,以大肠杆菌的优势密码子对所预测的优势抗表原位进行设计并合成,同时进行了最佳异源表达条件优化。结果表明,第218~238位的氨基酸残基序列为SVBV外壳蛋白的优势抗原表位,其编码片段为5-AE。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测结果表明,重组融合蛋白的分子量约为24.8 kD,与其理论分子量20.5 kD基本一致。异源表达优化的结果表明,当IPTG浓度为0.5 mmol/L、温度为40℃、诱导时间为4 h时,重组融合蛋白的表达量最高,为23.6 mg/L。Western blot结果表明重组融合蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应。串联质谱结果表明,5-AE肽段氨基酸残基序列正确。