编号 zgly0001561277

文献类型 期刊论文

文献题名 落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

作者 李小琴  张鹏远  任龙辉  代瑾然  王建光  陈穗云 

作者单位 云南大学生命科学学院  西南林业大学生命科学学院  云南香料烟有限责任公司 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2017年10期

年份 2017 

分类号 S432.41 

关键词 落葵皱缩花叶病毒  紫茉莉  cp基因  多克隆抗血清  ID-ELISA  蛋白质印迹法 

文摘内容 以感病紫茉莉叶片为材料,采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒（Basella rugose mosaic virus,Ba RMV）的外壳蛋白（coat protein,CP）基因,并构建p ET30a-Ba RMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta（DE3）Plys S],成功诱导表达得到大小约为40.0 k D的与预期大小相符的融合蛋白（His-CP）。SDS-PAGE电泳完毕后用0.25 mol·L-1的KCl溶液染色,将目的蛋白切胶纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗血清。间接酶联免疫吸附法（ID-ELISA）检测该抗体的效价为1︰16 000,Western-blotting分析表明该抗体具有很强的特异性。对野外感病紫茉莉和实验室内接种发病本氏烟检测结果也表明,所制备的抗体具有良好的特异性,可用于大规模样品检测。