编号 zgly0001573986

文献类型 期刊论文

文献题名 诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

作者 吴田  蓝增全  王华芳 

作者单位 西南林业大学园林学院  西南林业大学环境科学与工程学院  北京林业大学生物科学与技术学院 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2018年02期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S667.9 

关键词 基因克隆  内参基因  序列分析  表达分析 

文摘内容 为了解决诺丽实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成c DNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到p MD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序。序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96%)和相似性(98%)。q RT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在诺丽基因表达研究中作为内参基因。