编号 zgly0001383236

文献类型 期刊论文

文献题名 利用双向电泳技术分析山羊精子冷冻前后蛋白组的差异

作者 阮崇美  张子军  任春环  陈龙  张育军  程萧  章孝荣 

作者单位 安徽农业大学动物科技学院遗传育种与繁殖实验室 

母体文献 中国草食动物 

年卷期 2010年04期

年份 2010 

分类号 S827.34 

关键词 山羊精子  二维电泳  蛋白组学 

文摘内容 建立稳定的山羊精子蛋白质双向电泳的技术平台,对精子上样量、蛋白质提取方法、二维电泳程序等相关技术都进行了优化,得到了相对清晰的冻精和鲜精的二维电泳图谱,并运用Image Master TM 2D Platinum软件进行了分析。结果表明:通过改进的热Trizol法提取山羊精子蛋白,当取精子3×107、上样量为150μL时能取得较好的电泳图谱,鲜精的蛋白位点重复性较高的有650个±10个,冻精的蛋白位点重复性较高的有600个±10个。冷冻导致精子蛋白丢失约50个,而且冻精多表现为大分子量蛋白的丢失,大部分分布于60～100kb之间,其中60～80kb之间蛋白丢失约18个,80～100kb之间蛋白丢失近20个,12～60kb之间蛋白丢失近12个。实验初步探明了山羊精子融冻前后精子的蛋白变化规律,为进一步了解精子冷冻损伤的确切机理奠定了基础。