编号 zgly0001447915

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕酪氨酸羟化酶His394突变对酶结构和活性的影响

作者 张振旺  贡成良  许维岸  韩宏岩 

作者单位 苏州大学基础医学与生物科学学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2013年03期

年份 2013 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  酪氨酸羟化酶  定点突变  活性  结构  稳定性 

文摘内容 酪氨酸羟化酶作为儿茶酚胺类合成的限速酶,是人类、哺乳动物和昆虫新陈代谢不可或缺的酶类。以家蚕(Bombyxmori)酪氨酸羟化酶(BmTH)为研究对象,分析其氨基酸位点突变对酶结构与活性的改变,为研究酪氨酸羟化酶的功能位点以及表达调控提供依据。利用重叠延伸PCR技术将BmTH蛋白质序列的第394位氨基酸残基组氨酸(His394)突变为谷氨酰胺(Gln),成功获得家蚕酪氨酸羟化酶突变型BmTH-H394Q。BmTH-H394Q的活性仅为野生型BmTH活性的38%,且其热稳定性降低,易于聚沉;荧光光谱分析His394突变为Gln使酪氨酸羟化酶的色氨酸和疏水基团暴露增多;圆二色光谱分析显示BmTH-H394Q的α-螺旋结构含量减少了9.6个百分点,而β-折叠结构含量上升了8.0个百分点。据此可以推测,BmTH的氨基酸位点His394对酶的活性和结构稳定性起着重要作用,是维持其结构和功能所必需的基团。