编号 zgly0000568677

文献类型 期刊论文

文献题名 北方黑土土壤细菌16S rDNA扩增体系的优化

学科分类 220.1040;森林土壤学

作者 李秋红  吴凤芝 

作者单位 东北农业大学园艺学院 

母体文献 土壤学报 

年卷期 2008,45(2)

页码 341-347

年份 2008 

分类号 S154.3 

关键词 土壤细菌16S  rDNA  降落PCR  优化 

文摘内容 采用降落PCR方法扩增目的基因，设计两次正交试验对PCR反应体系中的各组分浓度进行筛选，同时对退火时间、延伸时间及循环次数进行摸索。结果表明，适合北方黑钙土土壤细菌16SrDNA扩增体系为：在25μl体系中，10×buffer2．5μl，DNA模板20ng，Mg^2＋ 2．5mmol L^-1,dNTPs0．25mmol L^-1，引物0．3μmol L^-1，TaqDNA聚合酶1．5U。降落PCR扩增程序为：95℃，5min；95℃，45s；65～56℃，60s；72℃，90s；每两个循环降低1℃。95℃，45s；55℃，60S；72℃，90s；10个循环。最后72℃，10min。