编号
zgly0001632078
文献类型
期刊论文
文献题名
观赏海棠SSR-PCR体系优化及引物筛选应用
作者单位
南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院
母体文献
南京林业大学学报(自然科学版
年卷期
2018年03期
年份
2018
分类号
S685.99
关键词
观赏海棠
SSR-PCR
体系优化
引物筛选
文摘内容
【目的】为探究适用于观赏海棠SSR反应分子标记研究的最佳PCR反应条件,采用正交设计法对观赏海棠SSR-PCR体系进行优化,并利用优化体系筛选适于观赏海棠的多态性SSR引物?!痉椒ā恳?个二倍体观赏海棠DNA模板为材料,采用L16(45)正交试验对DNA模板浓度、Taq酶浓度、引物浓度、Mg2+浓度和d NTP浓度进行优化实验,确立了观赏海棠SSR-PCR最佳反应体系?!窘峁康贸?5μL优化体系各成分为:DNA模板5 mg/L、Taq酶1.25 U、引物0.3μmol/L、Mg2+2 mmol/L、d NTP 0.25 mmol/L、1×Buffer1.5μL。利用优化体系在73对苹果属SSR引物中筛选出15对条带清晰、多态性丰富、重复性好的SSR引物并确定各引物的退火温度,其多态信息含量均大于0.25?!窘崧邸空皇匝榻峁锏接呕康?利用优化体系筛选的15对多态性引物可直接应用于观赏海棠SSR分子标记实验中,为观赏海棠品种鉴定、分类以及遗传育种等研究提供了有效工具。