编号 zgly0001347513

文献类型 期刊论文

文献题名 传染性喉气管炎病毒河南株gB基因的克隆、序列分析及其真核表达载体的构建

作者 廖仲磊  陈红英  李新生  崔保安  李祥瑞 

作者单位 南京农业大学兽医学院  河南农业大学牧医工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2008年10期

年份 2008 

分类号 S852.65 

关键词 传染性喉气管炎病毒  gB基因  聚合酶链反应  序列分析  真核表达载体 

文摘内容 【目的】构建传染性喉气管炎病毒(ILTV)的真核表达载体?！痉椒ā看哟拘院砥苎撞《竞幽现?ILTV-XY)感染的鸡胚绒毛尿囊膜中提取病毒DNA,进行PCR扩增,PCR产物进行T-A克隆与测序,获得了鸡IL-TV-XYgB全基因序列;对ILTV-XY株gB基因与GenBank中读取的5株ILTVgB基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行了比较分析;并将该基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,对构建的重组质粒pcDNA3.1/gB进行酶切、测序鉴定?！窘峁啃蛄胁舛ū砻?gB全基因核苷酸长度为2 629 bp,编码873个氨基酸,推导氨基酸序列有8个潜在的N-糖基化位点,有12个与二硫键形成有关的半胱氨酸。与GenBank中读取的澳大利亚SA2疫苗株、辽宁疫苗株、烟台株、美国632强毒株、英国Throne强毒株gB基因进行比较,核苷酸序列同源性为99%以上,与ILTV-SA2株gB基因比较发现,ILTV-XY株gB基因核苷酸序列在第89位均缺失1个碱基G,而在第102位又都插入1个碱基A,从而引起该毒株gB基因推导的氨基酸序列中第28~32位5个氨基酸的移码突变。构建的重组质粒pcD-NA3.1/gB经酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确?！窘崧邸砍晒菇薎LTV的真核表达质粒pcDNA3.1/gB,为ILTV核酸疫苗的研究奠定了基础。