编号 zgly0001659578

文献类型 期刊论文

文献题名 苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性

作者 崔婷婷  杜立新  彭琦  张杰  高继国  宋福平 

作者单位 东北农业大学生命科学学院  中国农业科学院植物?；ぱ芯克参锊〕婧ι镅Ч抑氐闶笛槭?ensp; 河北省农林科学院植物?；ぱ芯克?ensp;

母体文献 植物保护 

年卷期 2019年01期

年份 2019 

分类号 S476 

关键词 苏云金芽胞杆菌  cry基因启动子  转录活性  Cry晶体蛋白  晶体蛋白表达 

文摘内容 本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性。本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件。