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蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化

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编号 zgly0001468362

文献类型 期刊论文

文献题名 蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化

作者 武丽娟  樊永亮  宋月  张战凤  刘小凤  刘同先 

作者单位 西北农林科技大学  西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室  农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室  西北农林科技大学  西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室农  业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室 

母体文献 植物?;ぱП?ensp;

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S433.89 

关键词 蚜虫  蛋白质组  双向电泳  条件优化 

文摘内容 为优化有效分离蚜虫全蛋白的双向电泳体系,以豌豆蚜Acyrthosiphon pisum(Harris)为材料,比较了不同蛋白提取方法(裂解液提取法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、饱和酚抽提法)、蛋白上样量、IPG胶条p H梯度等条件对蚜虫全蛋白双向电泳的影响。结果表明:不同的蛋白提取方法所获得的豌豆蚜全蛋白提取率有显著差异,其中以饱和酚抽提法的提取率最高,为5.34±0.26 mg/g,且所提取的蛋白种类丰富度也优于其它2种方法;当蛋白上样量为100μg时所得蛋白点为1 793±36个,高于其它上样量;相同条件下选用11 cm p H 3~10非线性IPG胶条时所得蛋白点为1 803±42个,优于p H 4~7的IPG胶条。表明采用饱和酚抽提法进行提取蛋白,选用11 cm p H 3~10非线性IPG胶条,以蛋白银染方法、分离胶浓度为12.5%进行双向电泳时最适蛋白上样量为100μg,所得可识别蛋白质点最高,且重复性试验匹配率高,可用于豌豆蚜蛋白质组学研究。

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