编号 zgly0001461408

文献类型 期刊论文

文献题名 感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价

作者 谭老喜  张雨良  周朋  章绍延  王健华  张秀春  刘志昕 

作者单位 中国热带农业科学院热带生物技术研究所  农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室  海南大学环境与植物?；ぱг?ensp;

母体文献 植物研究 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S668.1 

关键词 香蕉束顶病毒  香蕉叶片  酵母双杂交cDNA文库 

文摘内容 为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your OwnMate&PlateTMLibrary System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。