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橡胶树花序总蛋白双向电泳研究体系的建立与优化

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编号 zgly0001528966

文献类型 期刊论文

文献题名 橡胶树花序总蛋白双向电泳研究体系的建立与优化

作者 王亚杰  位明明  李维国  王祥军  高新生 

作者单位 海南大学农学院  中国热带农业科学院橡胶研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年08期

年份 2016 

分类号 S794.1 

关键词 橡胶树花序  蛋白组学  蛋白提取  双向电泳 

文摘内容 以橡胶树热研7-33-97花序为试验材料,分别采取3种蛋白质提取方法(TCA/丙酮法,酚抽提法和Tris-丙酮-酚法)提取橡胶树花序总蛋白。对3种蛋白质提取方法的蛋白提取率、单向SDS-PAGE电泳和双向电泳结果进行分析比较,结果表明3种方法中TCA/丙酮法的提取率最高(6.09±0.22)mg/g,单向SDS-PAGE电泳条带清晰且较完整,双向电泳后获得的蛋白点最多(994±25),是建立橡胶树花序蛋白质组学研究体系的较好方法。进一步对基于TCA/丙酮法提取的橡胶树花序总蛋白质双向电泳体系进行优化,结果显示利用p H范围为4~7的IPG胶条,在聚焦时间为7.0×10~4 Vh、蛋白上样量为1.0×10~3μg,以及12.5%凝胶浓度条件下,考马斯亮蓝染色法获得的橡胶树花序蛋白质双向电泳图谱质量最好,可为橡胶树生殖发育相关蛋白质组学研究奠定良好基础。

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