编号 zgly0001527010

文献类型 期刊论文

文献题名 不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18表达量的影响

作者 刘思乐  康劲翮  谭支良  王征 

作者单位 中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室亚热带农业生态研究所湖南省农业生态过程重点实验室  湖南农业大学生物科学技术学院 

母体文献 动物营养学报 

年卷期 2016年04期

年份 2016 

分类号 S827 

关键词 山羊  瘤胃  上皮细胞  原代培养  分离  CK18 

文摘内容 本试验旨在研究不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18(CK18)表达量的影响。采集42日龄山羊的瘤胃上皮组织,分别采用酶消化法和组织块法对其进行体外培养。通过光学显微镜观察原代培养和传代培养阶段的细胞形态,检测第5代山羊瘤胃上皮细胞的生长曲线,并采用细胞免疫荧光法对山羊瘤胃上皮细胞进行鉴定。结果显示:1)经0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸消化获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于2 d开始贴壁生长,5 d细胞开始明显增多,10 d细胞数量达到最大。2)经组织块法获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于4 d开始爬出组织块,8 d细胞开始明显增多,14 d细胞数量达到最大。3)经免疫荧光染色显示2种方法获得的细胞胞浆内CK18均呈阳性表达且细胞纯度后者明显高于前者。4)组织块法获得的细胞CK18表达量显著高于酶消化法(P<0.05)。综合得出,与酶消化法相比,应用组织块法可成功获得纯度更高的山羊瘤胃上皮细胞。