编号 zgly0001652501

文献类型 期刊论文

文献题名 一种适用于田间LAMP检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法

作者 史梦玉  林春花  刘文波  缪卫国  郑服丛 

作者单位 海南大学热带农林学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年21期

年份 2018 

分类号 S763.7 

关键词 橡胶树白粉菌  甘油破壁法  DNA  LAMP检测 

文摘内容 为了探索建立一种快速、简便适用于田间LAMP (loop-mediated isothermal amplification)检测的橡胶树白粉菌DNA粗提取方法,在无液氮也不需要研磨的情况下,利用渗透压破壁的方法提取橡胶树白粉菌DNA。通过改变渗透压对橡胶树白粉菌DNA进行提取,使用特异性引物OH-666A (5’-ACTGACACCCCAT CACGACTAAAA-3’),OH-666S (5’-CATATTCTCACGAAGGAAAGCATTG-3’)进行PCR扩增,并与试剂盒提取DNA的PCR产物进行比较,对提取的DNA进行LAMP检测。20μL甘油加入600μL ddH2O,离心10 min,去上清,加50μL水离心2 min即可提出橡胶树白粉菌的DNA,PCR扩增能获得清晰目的条带,对得到的扩增产物进行测序,同时对提取的DNA进行LAMP检测,并与实验室常规方法比对,所有结果均一致。破壁法可用于橡胶树白粉菌DNA的快速提取,由于不需要特殊仪器,且快速方便,在田间容易实现,所以更适用于田间橡胶树白粉菌DNA的田间粗提取,对开展橡胶树白粉病田间分子预测提供了技术支持。