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龙眼亚硫酸盐氧化酶(DlSO)基因的克隆及表达分析

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编号 zgly0001492003

文献类型 期刊论文

文献题名 龙眼亚硫酸盐氧化酶(DlSO)基因的克隆及表达分析

作者 帅良  李静  韩冬梅  吴振先 

作者单位 华南农业大学园艺学院  广东省农业科学院果树研究所  广东省果蔬保鲜重点实验室 

母体文献 果树学报 

年卷期 2015年01期

年份 2015 

分类号 S667.2 

关键词 龙眼  亚硫酸盐氧化酶  基因克隆  荧光定量PCR  原核表达 

文摘内容 【目的】探讨龙眼果实亚硫酸盐氧化酶基因(DlSO)在硫残留生物降解中的作用?!痉椒ā恳粤圩躌NA为模板,采用RT-PCR结合RACE法获得龙眼亚硫酸盐氧化酶基因全长cDNA序列,命名为DlSO;运用荧光定量PCR对其表达量进行分析;使用ClontechIn-Fusion技术构建原核表达载体,使其在Rosetta(DE3)大肠杆菌中表达?!窘峁緿lSO序列全长1413bp,包含一个1182bp的开放阅读框,一个长37bp的5’非翻译区序列和194bp的3’非翻译区,预测编码393个氨基酸;同源性和系统进化分析结果均表明DlSO与毛果杨SO亲缘关系最近;荧光定量结果表明,在龙眼不同组织中,DlSO基因都有表达,其中在叶片中表达量最高,其次是花、幼果、根和果肉,在茎和果皮组织中DlSO基因的表达量最低;成功构建pET-32a-DlSO原核表达载体,经IPTG诱导后在Rosetta(DE3)大肠杆菌中成功表达?!窘崧邸靠寺×肆垩橇蛩嵫窝趸富?DlSO),并且成功构建了pET-32a-DlSO原核表达载体,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达出融合蛋白,为下一步研究龙眼亚硫酸盐氧化酶的作用奠定了基础。

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