编号
zgly0001743569
文献类型
期刊论文
文献题名
暴马?;瞥嗝顾睾铣苫騁GPS的克隆及诱导表达
作者单位
东北林业大学林学院
母体文献
中南林业科技大学学报
年卷期
2022,42(7)
页码
160-168
年份
2022
分类号
S718.81
关键词
暴马?;?ensp;
牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶
基因克隆
赤霉素
茉莉酸甲酯
诱导表达
文摘内容
【目的】对参与暴马?;瞥嗝顾睾铣赏揪豆丶?牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS)基因进行克隆及诱导表达研究,以期深入了解暴马?;频纳し⒂?为获得优质高产的暴马?;凭晏峁├砺垡谰??!痉椒ā坎捎肞CR扩增技术获得暴马?;艷GPS基因cDNA全长及启动子序列,利用生物信息学软件对序列进行分析;qRT-PCR技术分析不同浓度茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对暴马?;艷GPS基因转录水平的影响,并用分光光度计测定不同浓度MeJA诱导下赤霉素含量的变化;电子天平称量暴马桑黄菌丝体生物量;SDS-PAGE检测暴马?;艷GPS基因原核表达情况。【结果】将克隆得到的暴马?;艷GPS启动子和基因分别命名为SbGGPS启动子和SbGGPS基因。SbGGPS启动子分析结果显示,除了含有CAAT-box、TATA-box典型的启动子作用元件之外,还含有MeJA响应元件?;蚍治龇⑾?SbGGPS基因cDNA序列全长945 bp,共编码314个氨基酸,蛋白相对分子量35.89 kDa,不存在信号肽和跨膜结构。荧光定量分析、赤霉素含量测定及生物量检测结果表明,SbGGPS基因转录水平、赤霉素含量及生物量均随着MeJA浓度增加呈现显著下降的趋势,三者变化趋势基本一致,并且两两之间均呈显著正相关。SDS-PAGE结果显示,SbGGPS基因能够在原核系统中成功表达出蛋白?!窘崧邸客ü許bGGPS基因的克隆及诱导表达分析发现,该基因在暴马?;瞥嗝顾厣锖铣杉吧し⒂讨芯哂兄匾饔?。