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正交试验法确定测定意大利蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶反应的最佳条件

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编号 zgly0001298753

文献类型 期刊论文

文献题名 正交试验法确定测定意大利蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶反应的最佳条件

作者 张莹  黄建  高希武 

作者单位 福建农林大学植物?;ぱг?ensp; 福建农林大学植物保护学院  中国农业大学昆虫学系 福州350002  中国农业大学昆虫学系  北京100094  福州350002  北京100094 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2005年04期

年份 2005 

分类号 S893.3 

关键词 蜜蜂  乙酰胆碱酯酶  正交试验  方差分析  最佳条件 

文摘内容 用正交试验法研究了酶浓度、底物浓度、反应体系的pH值、反应温度和反应时间5个因素对测定意大利蜜蜂ApismelliferaligusticaSpinola头部乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,并从试验组合中选出最佳条件。蜜蜂AChE活性的测定采用Gorun(1978)改进的Ellman方法,以碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)为底物,5,5’-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,测定反应物在412nm波长下的光密度值,用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量,经计算得到蜜蜂头部AChE的比活力。对正交试验结果进行极差分析和方差分析,结果表明各因素对实验结果影响的大小顺序为:温度>pH值>时间>酶浓度>底物浓度。并得出测定蜜蜂头部AChE活性的最佳条件是:酶终浓度0.2头/mL、底物终浓度0.8mmol/L、pH值7.5、温度40℃及反应时间5min。

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