编号 zgly0001722292

文献类型 期刊论文

文献题名 暴马?；芐bLSD基因克隆及差异表达分析

作者 刘增才  王世新  孙婷婷  曲晓磊  邹莉 

作者单位 东北林业大学林学院  哈尔滨学院食品工程学院 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2020年11期

年份 2020 

分类号 S567.3 

关键词 暴马?；?ensp; 羊毛甾醇14α-脱甲基酶  基因克隆  生物信息学分析  表达分析 

文摘内容 【目的】暴马?；剖且恢种匾囊┯米试?三萜是其发挥药用功效的主要成分,但是目前获取大量三萜仍然非常困难。通过对暴马?；迫坪铣赏揪吨械难蛎薮?4α-脱甲基酶(lanosterol 14-alpha-demethylase,LSD)基因进行克隆及差异表达分析,以期深入了解暴马?；迫坪铣傻牡骺鼗?进而提高三萜产量。【方法】采用PCR扩增得到LSD基因cDNA序列全长,利用生物信息学软件对该基因编码的氨基酸序列进行分析;采取同源重组方法构建原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)后诱导表达,SDS-PAGE检测;qRT-PCR技术分析LSD基因在暴马?；撇煌⒂锥巫妓讲钜??！窘峁勘┞砩；芁SD基因cDNA全长1 662 bp,编码553个氨基酸,相对分子量为62.26 kDa,命名为SbLSD(登录号为MN864180);跨膜区和亚细胞定位预测显示SbLSD蛋白是在内质网和高尔基体发挥作用的跨膜蛋白;系统进化树结果表明暴马?；坪土橹サ腖SD蛋白同源性最高,符合物种经典分类;SDS-PAGE结果证实在62.26 kDa附近出现目的蛋白条带,说明所获得的基因可以成功表达出蛋白;从荧光定量分析结果中可以看出SbLSD基因转录水平在不同发育阶段有差异性,并且在子实体阶段该基因转录水平最高,与羊毛甾醇合成的基因变化规律相吻合?！窘崧邸客ü許bLSD基因的分子鉴定解析,为进一步揭示该基因在暴马?；迫坪铣赏揪吨械墓δ艿於ɑ?。