编号 zgly0001374175

文献类型 期刊论文

文献题名 蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达

作者 秦平伟  段明革  孙文婷  李名扬  徐晶 

作者单位 西南大学园艺园林学院  重庆市花卉工程技术研究中心  重庆城市管理职业学院 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2010年S2期

年份 2010 

分类号 S685.99 

关键词 金属硫蛋白  克隆  序列分析  原核表达 

文摘内容 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒对其进行纯化回收,得到了高纯度蛋白,为今后研究奠定基础。