编号 zgly0001576542

文献类型 期刊论文

文献题名 粘虫过氧化氢酶基因的克隆与表达分析

作者 李鸿波  戴长庚  张昌容  何永福  胡阳 

作者单位 贵州省农业科学院植物?；ぱ芯克?ensp;

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2018年02期

年份 2018 

分类号 Q963 

关键词 粘虫  过氧化氢酶  基因克隆  表达谱  氧化胁迫  实时荧光定量PCR 

文摘内容 【目的】过氧化氢酶（CAT）的主要功能是将过氧化氢分解成水和氧气,从而使生物免受氧化损伤的伤害。本研究旨在探索CAT在粘虫Mythimna separata抗氧化胁迫中的作用?！痉椒ā坎捎肦T-PCR和RACE技术克隆粘虫CAT基因的cDNA全长序列和基因组序列,利用生物信息学软件分析该基因及其编码蛋白质的序列特性;运用实时荧光定量PCR（qPCR）技术分析该基因在不同发育阶段（卵、1-6龄幼虫、蛹和成虫）、5龄幼虫不同组织（头、表皮、前肠、中肠、后肠和马氏管）以及毒死蜱、高温和密度胁迫下幼虫中的表达谱?！窘峁靠寺〉玫降恼吵鍯AT基因命名为MsCAT（GenBank登录号:MF737386）,其全长cDNA长1 846 bp,开放阅读框为1 602 bp,编码533个氨基酸。序列分析发现MsCAT具有CAT家族典型的结构域,包括一个基部活化位点标签(88FDRERIPERVVHAKGAGA105),一个NADPH结合位点(216VTHQVLYLFGD226)和一个亚铁血红蛋白结合位点(379RLFSYSDTH386)。DNA序列分析表明,在MsCAT编码区99 bp处插入了一个612 bp的内含子。系统发育分析显示,MsCAT与夜蛾科（Noctuidae）昆虫的亲缘关系最近。MsCAT在粘虫的各个发育阶段和5龄幼虫各组织中均表达,分别在6龄幼虫和幼虫中肠中的表达量最高。取食经1μg/mL毒死蜱处理的玉米叶片24 h后,幼虫体内MsCAT表达量显著上调,但随浓度提高,表达量反而下降;在3337℃温度处理后,幼虫MsCAT的表达量显著高于对照（24℃）,而39℃处理幼虫MsCAT的表达量下调;此外,随饲养密度的增加幼虫体内MsCAT的表达显著下调?！窘崧邸勘狙芯靠寺〉玫降恼吵鍯AT基因的cDNA全长序列（MsCAT）是可靠的,并且MsCAT在粘虫发育及抗氧化胁迫中具有重要的作用。